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賽多利斯血小板裂解液過濾

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細胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為終濃度來制備完整的細胞培養(yǎng)基。3.應在完全細胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應避免ELAREMPrime的重復凍融循環(huán),因為這會導不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預熱一份完整的細胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。

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本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細胞,每次傳代結束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代。

美國Sexton的血小板裂解液的血小板來源于美國FDA注冊、AABB認證的美國血庫。單位必須在過期前接受異體輸血。血小板捐獻者接受捐贈前進行徹底篩查和檢測,以降低輸血傳播ganran的風險,根據(jù)21CFR610和AABB血庫和輸血服務標準。

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為了排除肝素對于細胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關。我們對不添加防腐劑的肝素進行了相同實驗,結果對AT-MSC和BM-MSC細胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細胞群體倍增指數(shù)(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結合泊松統(tǒng)計進行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結論一致。美國Sexton Biotechnologies專注于細胞和基因zhi liao行業(yè)生產工具的開發(fā)和銷售,開發(fā)了適用于CGT行業(yè)生產的工具和產品,以實現(xiàn)細胞制造過程的靈活自動化和規(guī)?;?,從而提高臨床結果成功的概率,減少上市時間和勞動力成本。Sexton目前已經商業(yè)化的產品包括CellSeal低溫瓶(高通量細胞灌裝系統(tǒng),zhuan yong于細胞zhi liao產品的專業(yè)化存儲,耐-196℃)以及人血小板裂解液生長補充劑。更多關于Sexton血小板裂解液相關產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!

美國Sexton無動物源人血小板裂解液hPL已被上百篇文獻報道了美國Sexton公司的血小板裂解液為間充質干細胞MSCs以及CAR-T/NK細胞擴增的良好的細胞培養(yǎng)補充劑,根據(jù)用戶科研和臨床以及GMP生產需求,提供臨床或研究級配方,同時滿足質量和監(jiān)管要求,在FDA已經備案藥物主文件BMF,在全球臨床干細胞和免疫tumour學應用中用作高性能FBS替代品,主要特點如下:兼容性:作為培養(yǎng)基補充劑,替代胎牛血清FBS或AB血清,適用于很多的細胞類型包括MSCs,T細胞,NK細胞,內皮細胞等的培養(yǎng)。安全性:在ISO9001認證的設施中驗證了病原體的減少,并進行了無菌,支原體和內dusu等測試重現(xiàn)性:通過匯集來自AABB認證/FDA注冊血液中心的100多名美國人體捐獻者,比較大限度地減少了批與批之間的差異可靠性:AABB認證/FDA注冊官方認證血源合規(guī)性:在歐洲藥典5.2.12.4章則要求的環(huán)境下生產,在FDA已進行BMF備案無需肝素:產品生產過程和使用過程都無需添加肝素易于使用:直接按比例添加入培養(yǎng)基,可選規(guī)格100ml和500ml穩(wěn)定供應:上海曼博生物作為美國Sexton品牌hPL產品在中國的一級代理商,為細胞zhi liao企業(yè)提供國內細胞zhi liao企業(yè)需要的長期現(xiàn)貨的hPL,為臨床以及大規(guī)模商業(yè)化生產保駕護航。在使用前需要過濾掉血小板裂解液中的沉淀嗎?

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